本發(fā)明公開了一種苜蓿根瘤菌的磷脂脂肪酸生物標(biāo)記物及生物測(cè)算方法，其步驟是：1)采集土壤樣品提取磷脂脂肪酸；2)氣相色譜？質(zhì)譜聯(lián)用儀分析磷脂脂肪酸組成；3)對(duì)各磷脂脂肪酸進(jìn)行歸類并找出苜蓿根瘤菌的磷脂脂肪酸生物標(biāo)記物；4)以此磷脂脂肪酸標(biāo)記物含量計(jì)算苜蓿根瘤菌生物量。方法是經(jīng)過(guò)對(duì)苜蓿根瘤菌純培養(yǎng)菌株的磷脂脂肪酸組成分析，篩選其特異性磷脂脂肪酸并定為其專一性生物標(biāo)記物，再通過(guò)土壤取樣分析確證的專一性磷脂脂肪酸生物標(biāo)記物。本發(fā)明是針對(duì)苜蓿根瘤菌篩選到的專一性磷脂脂肪酸生物標(biāo)記物，可以用于測(cè)算土壤中苜蓿根瘤菌的生物量。